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胎牛血清在使用過(guò)程中的注意事項(xiàng)有哪些?

更新時(shí)間:2023-11-21點(diǎn)擊次數(shù):1072

胎牛血清是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑,通常用于增強(qiáng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖能力。那么你知道胎牛血清在使用過(guò)程中的注意事項(xiàng)有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!

一、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損

血清解凍時(shí)應(yīng)將血清從-15~-70℃的低溫冰箱中取出放入4℃冰箱解凍1天,待全部解凍后再分裝。解凍過(guò)程中請(qǐng)不時(shí)搖勻(小心勿造成氣泡),使血清成分和溫度均勻,從而減少沉淀的產(chǎn)生。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,并避免反復(fù)凍融。需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁同時(shí)血清中的有效成分會(huì)被破壞,而影響血清質(zhì)量。

二、有時(shí)在血清中見(jiàn)到的絮狀沉淀可能是些什么物質(zhì)

主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,可用400 xg離心5 min去除,也可不用處理。

三、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀

(1) 解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。

(2) 血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。

(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。

(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。

(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,無(wú)須做此步驟。

(6) 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。

四、熱滅活對(duì)血清的作用是什么

熱滅活步驟能夠滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。補(bǔ)體會(huì)參與以下事件中:溶解細(xì)胞事件,平滑肌收縮,肥大細(xì)胞與血小板釋放組胺,吞噬作用增強(qiáng),趨化作用,淋巴細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的活化等。

五、加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎

不是必須的,看做什么實(shí)驗(yàn)。如果用于培養(yǎng)普通細(xì)胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長(zhǎng)因子。但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞,血清是需要滅活,一般是56℃30min。

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