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細(xì)胞分選磁極的原理

更新時(shí)間:2025-07-28點(diǎn)擊次數(shù):199

一、磁極在磁性細(xì)胞分選中的作用原理

磁性細(xì)胞分選的核心步驟是:

磁性標(biāo)記: 目標(biāo)細(xì)胞通過(guò)與表面包被有特異性抗體(針對(duì)目標(biāo)細(xì)胞表面標(biāo)志物)的超順磁性微珠結(jié)合,從而被磁化"

磁場(chǎng)分選: 將標(biāo)記好的細(xì)胞懸液通過(guò)或置于細(xì)胞分選磁極產(chǎn)生的磁場(chǎng)區(qū)域。

分離捕獲:

在高梯度磁場(chǎng)的作用下,結(jié)合了磁性微珠的目標(biāo)細(xì)胞會(huì)被強(qiáng)大的磁力捕獲并滯留在磁極表面或磁極內(nèi)部的分離基質(zhì)(如填充了鐵絲的柱子)上。

未標(biāo)記的非目標(biāo)細(xì)胞則不受磁場(chǎng)影響(或影響極小),隨液體流穿過(guò)磁極區(qū)域。

洗脫收集: 移除磁場(chǎng)后,被捕獲的目標(biāo)細(xì)胞失去磁力束縛,即可被洗脫下來(lái)進(jìn)行收集。

磁極的核心作用就體現(xiàn)在第2和第3步: 它提供的高梯度磁場(chǎng)是區(qū)分和捕獲磁性標(biāo)記細(xì)胞與非標(biāo)記細(xì)胞的物理基礎(chǔ)。梯度越高,在微小距離上產(chǎn)生的磁力變化越大,對(duì)小尺寸磁性微珠的捕獲效率就越高。

二、應(yīng)用領(lǐng)域

免疫學(xué)研究: 分離特定免疫細(xì)胞亞群(如T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞等)進(jìn)行功能研究。

干細(xì)胞研究: 富集造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。

腫瘤學(xué)研究: 分離循環(huán)腫瘤細(xì)胞、腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞。

細(xì)胞治療: CAR-T、TCR-T等過(guò)繼性細(xì)胞免疫治療中,分離、富集或去除特定細(xì)胞。

微生物學(xué): 分離特定病原體或微生物。

分子生物學(xué): 分離核酸結(jié)合蛋白或特定細(xì)胞器(需特殊磁珠)。

診斷: 用于某些體外診斷試劑盒中富集目標(biāo)分析物。

三、選擇與使用注意事項(xiàng)

匹配分選柱/容器: 磁極必須與所使用的分選柱(如MACS® Column)或樣品容器(如試管、多孔板)的尺寸和形狀精確匹配,以確保最佳的磁場(chǎng)覆蓋和分選效果。

磁場(chǎng)強(qiáng)度與梯度: 根據(jù)目標(biāo)細(xì)胞大小、磁珠大小和結(jié)合強(qiáng)度選擇合適的磁極(通常廠商會(huì)標(biāo)明其磁極性能)。處理難分細(xì)胞或需要ji純度時(shí),可能需要更強(qiáng)磁場(chǎng)或更高梯度的磁極。

操作規(guī)范: 嚴(yán)格按照分選試劑盒或儀器說(shuō)明書(shū)操作,包括上樣速度、緩沖液選擇、洗滌次數(shù)等,這些都會(huì)影響磁極的捕獲效率和最終分選純度/得率。

維護(hù): 永磁體磁極避免劇烈撞擊、高溫和強(qiáng)反向磁場(chǎng),以防退磁。電磁體注意散熱和電路維護(hù)。

四、常見(jiàn)問(wèn)題 (FAQ)

Q:磁極的磁場(chǎng)會(huì)傷害細(xì)胞嗎?

A:磁場(chǎng)本身對(duì)細(xì)胞沒(méi)有已知的直接傷害。分離的溫和性主要源于磁珠與細(xì)胞的特異性結(jié)合以及低剪切力的操作過(guò)程。

Q:永磁體和電磁體哪個(gè)更好?

A:各有優(yōu)勢(shì)。永磁體簡(jiǎn)單便攜成本低,適合手動(dòng)操作和小樣本;電磁體可控性強(qiáng),便于自動(dòng)化,適合大樣本和需要精確控制磁場(chǎng)的應(yīng)用。

Q:為什么需要高梯度磁場(chǎng)?

A:細(xì)胞攜帶的磁性微珠體積小、磁矩有限。高梯度磁場(chǎng)能在微小空間內(nèi)產(chǎn)生足夠強(qiáng)的磁力,確保這些小磁珠(及其標(biāo)記的細(xì)胞)被有效捕獲,而不僅僅是強(qiáng)磁場(chǎng)(均勻磁場(chǎng)對(duì)小磁珠作用力很弱)。

Q:分選純度/得率不高可能和磁極有關(guān)嗎?

A:有可能。磁極磁場(chǎng)強(qiáng)度不足、梯度不夠、與分選柱/容器不匹配、或操作不當(dāng)(如流速過(guò)快)都可能導(dǎo)致捕獲效率下降,影響得率和純度。但更多時(shí)候需先排查抗體-磁珠標(biāo)記效率、樣本制備、緩沖液等因素。

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