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常見的RNA提取方法

更新時(shí)間:2023-10-10點(diǎn)擊次數(shù):1952
 不同組織RNA提取原理是將細(xì)胞裂解,釋放出 RNA,并通過不同方式去除蛋白,DNA 等雜質(zhì),最終獲得高純度 RNA 產(chǎn)物的過程。那么你知道常見的RNA提取方法有什么嗎?讓我們一起來看看吧!

一、酚氯仿抽提(有機(jī)試劑抽提)

原理:將被裂解的生物樣本,混勻離心分相以后,RNA在上層水相,DNA,蛋白質(zhì)在中間層,下層有機(jī)相。收集水相加入乙醇或異丙醇可沉淀RNA,漂洗后得到RNA。

優(yōu)點(diǎn):得率高、可提取到含miRNA和其他小RNA在內(nèi)的總RNA

缺點(diǎn):用到苯酚、氯仿等有毒試劑。

二、硅膠柱法抽提

原理:硅基質(zhì)材料在一定的高鹽緩沖系統(tǒng)下高效、專一地吸附核酸。(高鹽低pH吸附核酸,低鹽高pH釋放核酸。

優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單、安全無毒

缺點(diǎn):需配合高速離心機(jī)使用;提取的總RNA不含小于200nt的小RNA。

三、磁珠法抽提

原理:納米微球磁珠材料表面涂上一層二氧化硅,使磁珠獲得吸附能力。

優(yōu)點(diǎn):磁場(chǎng)中快速分離,無需離心,可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作。

缺點(diǎn):成本較高;提取的RNA可能殘存磁珠。

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